玻璃层析柱基于分子化合物在不同化学环境下具有不同的亲和性原理,通过将待分离物质注入柱内,利用分子之间的相互作用分离和分析分子化合物。
通常情况下,内部填充有一种或多种分离介质,例如硅胶、聚丙烯酰胺凝胶、离子交换树脂及其它化学试剂。这些介质不同于色谱柱中的针孔层析,
其内部存在大小不一的孔隙和通道,维持着一个复杂的多相反应体系的存在。
介质通过表面有官能团进行函数化修饰,构成有反相、离子交换等特定功能的层析介质。当样品被投放到层析柱中,不同的分子之间会发生一系列的亲和性和排斥性反应,在分子大小、相对极性等相互作用加持下分离出不同分子化合物,达到分析和纯化的目的。
玻璃层析柱具有以下优点:
1.适用范围广:可以对多种分子化合物进行分离和分析,覆盖了生命科学、医药、环保等领域中众多化合物。
2.实验简单、易于操作:仅需少量的材料比色谱柱更易于掌握。
3.显著的经济性:成本相较同类型的离子交换色谱柱低廉,容易获得。
玻璃层析柱的使用注意事项:
1.适当选择适合自己的层析柱,样品的来源、性质、分子量、配制溶液等都需要考虑。
2.操作前应该检查样品的纯度、含量以及颜色和形态,避免污染和混合。
3.选择合适的溶液和流量,调整凝胶和样品的pH,慢慢地加入溶液,让溶液流经层析柱。
4.注意控制层析柱内流速,在实验开始前一定要检查好流速,如果忽视这个点,就会对实验结果产生不良的影响。
5.注意安全,在操作过程中要小心,要避免玻璃柱断裂等现象发生。